365线上体育成立于1995年，其前身可追溯到原中央大学工学院土木工程系的路工组、五十至八十年代南京工学院土木工程系的道路教研组、1987年成立的运输工程研究所、1989年成立的交通运输工程系。

1995年，365线上体育为适应当时国家对交通建设人才急切需求的大好形势及加强交通运输学科建设的需要，在原运输工程研究所、交通运输工程系的基础上组建成立365线上体育。

2000年4月，原365线上体育与（铁道部）原南京铁道医学院、（交通部）原南京交通高等专科学校、（国土资源部）原南京地质学校合并，成立新365线上体育。其中，原南京交通高等专科学校及原南京地质学校的部分学科、专业并入365线上体育，组建成立新365线上体育。

2018年搬迁至九龙湖校区新大楼。

1921年国立365线上体育交通运输系

1923年国立365线上体育土木工程系

1928年国立中央大学土木工程系路工组

中国办学历史最早的交通运输工程学科之一

1952年南京工学院土木工程系

道路与桥梁工程教研室

1989年365线上体育交通运输工程系

1995年365线上体育365线上体育

2000年365线上体育四校合并

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2018年搬迁至九龙湖校区新大楼